【摘 要】
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目的观察阻断及沉默Raw264.7细胞糖皮质激素受体(GR)对青藤碱(SIN)抗炎作用的影响。方法采用小鼠巨噬细胞系Raw264.7为研究对象,以脂多糖(LPS)诱导细胞炎症模型,选择糖皮质激
【机 构】
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广州中医药大学临床药理研究所免疫研究室,
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目的观察阻断及沉默Raw264.7细胞糖皮质激素受体(GR)对青藤碱(SIN)抗炎作用的影响。方法采用小鼠巨噬细胞系Raw264.7为研究对象,以脂多糖(LPS)诱导细胞炎症模型,选择糖皮质激素药地塞米松(Dex)作为阳性药,选用GR特异性拮抗剂米非司酮(Ru486)进行干预,并采用si RNA技术沉默GR。ELISA检测细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的变化,Western blot检测GR的表达,实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测TNF-α、IL-6 m RNA水平的变化。结果 q RT-PCR和ELISA检测结果显示LPS刺激下Raw264.7细胞的TNF-α与IL-6在m RNA和蛋白水平均升高(P<0.05),Dex和SIN作用后均可明显降低其表达(P<0.05),但在GR拮抗剂干预下,Dex和SIN的抗炎作用被抑制,与LPS组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。炎症状态下,GR蛋白表达较正常组明显降低(P<0.05),Dex和SIN对GR蛋白表达的影响不明显(P>0.05)。si RNA技术成功沉默GR蛋白表达后,Dex和SIN的抗炎作用明显被减弱(P<0.05)。结论SIN能通过作用于GR发挥抗炎作用,具有类皮质激素样作用,GR是SIN发挥抗炎作用的靶点之一。
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