【摘 要】
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使用差速离心浓缩的病毒免疫山羊,获得高免血清并提取IgG,即为抗流行性造血器官坏死病病毒(EHNV)多克隆抗体。利用纯化的EHNV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,
【机 构】
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中国农业大学动物医学院,北京市东城区动物卫生监督所,北京出入境检验检疫局,中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所
【基金项目】
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十二五科技支撑课题“重大外来与新发水生动物疫病识别与监测技术研究及示范”(2013BAD12B02)
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使用差速离心浓缩的病毒免疫山羊,获得高免血清并提取IgG,即为抗流行性造血器官坏死病病毒(EHNV)多克隆抗体。利用纯化的EHNV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,经有限稀释法亚克隆,获得杂交瘤细胞株。将杂交瘤接种小鼠诱生腹水获得单抗3A4。以抗EHNV多克隆抗体为捕获抗体,单抗3A4为检测抗体,使用HRP标记的羊抗鼠IgG作为酶标二抗,建立了EHNV的抗原捕获ELISA方法。该方法可检出103TCID50的病毒液上清和0.0056μg的MCP重组蛋白。对纯化的GCRV、IHNV、IP
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