超低温冷冻过程引起猪精子产生“似凋亡"变化

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测定超低温冷冻保存过程能否诱导猪冻融精子产生“似凋亡”变化,探讨猪冻融精子活力降低的分子机理。利用Annexin—V/PI及JC-1荧光抗体试剂盒与流式细胞术相结合的方法,检测猪精子冷冻前后及不同培养时间冻融精子质膜中磷脂酰丝氨酸(Ps)位置及线粒体膜电位(△‰)变化;蛋白免疫印迹分析方法测定猪精子Bcl2、Caspase-9及Caspase-3等“凋亡”因子含量变化。猪精子超低温冷冻保存后活性精子的比例(54.4%)显著低于鲜精组(87.9%)(P〈O.05),其中PS移位的精子“似凋亡”比例约为26.
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