【摘 要】
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应用RT-PCR技术从ConA诱导培养的大熊猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到大熊猫IL-4基因,并将其克隆到PGEM-T载体中.经菌落PCR鉴定、序列测定及序列分析,结果表明,克隆得到的IL
【机 构】
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成都大熊猫繁育研究基地,四川农业大学
【基金项目】
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四川省成都市大熊猫繁育研究基金;
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应用RT-PCR技术从ConA诱导培养的大熊猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到大熊猫IL-4基因,并将其克隆到PGEM-T载体中.经菌落PCR鉴定、序列测定及序列分析,结果表明,克隆得到的IL-4基因开放阅读框由396个核苷酸组成,编码一个由132个氨基酸组成的多肽,包括编码24个氨基酸的信号肽和108个氨基酸的成熟肽.与GenBank中已登录的大熊猫IL-4(DQ166512)的核苷酸序列同源性分剐为99.5%和100%;与其他哺乳动物如犬、猫、人、猪、牛、羊、马、兔、鼠等的IL-4核苷酸同源性为50.7%(鼠)~87.7%(犬);IL-4编码氨基酸同源性在35.7%(鼠)~783.8%(犬);进化树构建结果表明,大熊猫与犬、猫遗传距离最近.
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