鸡内金是临床治疗食积不消、呕吐泻痢和小儿疳积的常用药物，也是儿童消食类中成药的高频药味。近几十年，鸡内金药材来源发生重大变化，饲养鸡鸡内金取代杂食性土鸡鸡内金成为主要药材来源，可能导致药材品质的显著变化。本研究采用主客观感官评价、生物评价和化学分析等方法，对比土鸡与饲养鸡鸡内金的气味和品质差异。采用臭味层次分析法（flavor profile analysis，FPA）对比二者腥臭气味强度差异，发现土鸡鸡内金腥臭气明显弱于饲养鸡鸡内金。采用顶空-固相微萃取-气相色谱-三重四极杆质谱法（HS-SPME/GC-QQQ-MS/MS）发现二者总体气味与腥臭气味产物组成一致，气味活度值（odor activity value，OVA）分析结合正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）表明二甲基三硫、2-甲氧基-3-异丁基吡嗪和2-甲基异冰片是鸡内金的关键性腥臭味成分（OAV≥1），饲养鸡鸡内金中腥臭气成分含量是土鸡鸡内金的1.12～2.13倍。采用胃蛋白酶活力效价测定法发现饲养鸡鸡内金平均效价为15.679 U.mg-1，而土鸡鸡内金平均效价为26.529 U.mg-1，土鸡鸡内金胃蛋白酶活力明显更强。柱前衍生化RP-HPLC测定结果表明，土鸡鸡内金中氨基酸总含量、促消化类氨基酸含量分别是饲养鸡鸡内金的1.12倍与1.15倍，苦味氨基酸也是饲养鸡鸡内金的1.21倍。上述研究表明，土鸡鸡内金较饲养鸡鸡内金具有较低的腥臭气、较高的酶活力与促消化类氨基酸含量以及较强的苦味。该研究为认识鸡内金药材质量变异提供了科学依据，也为更好地区分鉴别优质鸡内金提供了方法参考，对于鸡内金药食同源开发与大品种培育具有一定价值。