【摘 要】
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目的 研究干扰HOTTIP(HOXA transcript at the distal tip)的表达对卵巢癌细胞系SKOV3细胞侵袭、迁移能力及凋亡的影响.方法 选取人正常卵巢癌上皮细胞IOSE 80和人卵巢癌细胞
【机 构】
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哈尔滨医科大学附属第二医院妇产科,150081
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目的 研究干扰HOTTIP(HOXA transcript at the distal tip)的表达对卵巢癌细胞系SKOV3细胞侵袭、迁移能力及凋亡的影响.方法 选取人正常卵巢癌上皮细胞IOSE 80和人卵巢癌细胞SKOV3检测其中HOTTIP的表达情况.在确定HOTTIP在SKOV3细胞中高表达后,用慢病毒将干扰HOTTIP的shRNA转染进SKOV3细胞,构建HOTTIP的稳定敲减克隆.再分别构建阴性对照shRNA组(转染阴性对照质粒的克隆)和空白的对照组(未经转染的人卵巢癌SKOV3细胞),用PCR凝胶电泳及real-time PCR法检测3组细胞的HOTHP表达,以确定转染效率.随后,Transwell小室及划痕实验检测干扰HOTTIP对细胞侵袭迁移能力的影响.Western印迹法检测干扰HOTTIP对凋亡相关通路蛋白表达的影响.结果 干扰HOTTIP可使SKOV3细胞的划痕愈合率及细胞侵袭数目显著下降,使促凋亡蛋白表达上调,抗凋亡蛋白表达下调(P均＜0.05).结论 干扰HOTTIP可使SKOV3细胞的侵袭迁移能力显著下降,使细胞的凋亡增加.
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