Sulforaphane抑制热灭活大肠杆菌诱导的HeLa细胞凋亡

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目的

研究Sulforaphane(SFN)对细胞凋亡的抑制作用及其在脓毒症中对细胞的保护作用。

方法

将HeLa细胞分为4组:对照组、热灭活大肠杆菌(Escherichia coliE.coli)处理组、SFN处理组(SFN组)和热灭活E.coli +SFN组。酶联免疫反应检测炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α;流式细胞术(annexin V /propidium iodide双染)检测细胞凋亡;免疫荧光检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量及线粒体膜电位的变化;Western blot检测活化的caspase 3、bax和bcl-2水平。

结果

热灭活E.coli处理后,细胞产生的炎症因子IL-1β[(121.13±8.44) pg/mL比(36.67±5.82) pg/mL,P<0.05]和TNF-α[(123.83±7.32) pg/mL比(20.63±1.91) pg/mL,P<0.05]明显升高、凋亡细胞数明显增加[(32.49±3.96)%比(12.52±1.37)%,P<0.05]、活化的caspase 3[(2.28±0.19)比(1.01±0.19),P<0.05)]和BAX[(4.81±0.80)比(1.04±0.25),P<0.05)]水平明显升高,而bcl-2[(0.27±0.08)比(0.96±0.18),P<0.05)]水平明显降低。用SFN处理后(包括SFN组、热灭活E.coli +SFN组),IL-1β[(45.41±13.16) pg/mL比(121.13±8.44) pg/mL,P<0.05],TNF-α[(30.3±6.0) pg/mL比(123.8±7.3) pg/mL,P<0.05]水平明显降低、凋亡细胞明显减少[(11.34±2.05)%比(32.49±3.96)%,P<0.05]、活化的caspase3[(1.01±0.07)比(2.282±0.19),P<0.05)]、BAX[(2.15±0.14)比(4.81±0.80),P<0.05)]明显减少,而bcl-2[(1.34±0.18)比(0.27±0.08),P<0.05)]水平明显增加。与此相对应,与灭活E.coli处理的细胞相比较,加入SFN(包括SFN组和热灭活E.coli +SFN组),ROS水平明显下降[(1.27±0.17 )比(6.30±1.50),P<0.05)],而线粒体膜电位明显上升[(1.18±0.10)比(0.14±0.01),P<0.05)]。

结论

SFN可有效抑制热灭活E.coli诱导的HeLa细胞调亡、稳定线粒体膜电位、降低ROS、抑制炎性因子的产生。因此,SFN可能作为脓毒血症时保护细胞的药物。

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