【摘 要】
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鸡传染性支气管炎病毒HN99株核蛋白(N)基因PCR产物经BamH Ⅰ、HindⅢ双酶切,克隆人大肠杆菌原核表达载体pMAL-p2X,构建重组表达质粒pMAL-p2X-N,转化大肠杆菌TB1并进行诱导表达.
【机 构】
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西北农林科技大学动物科技学院,河南农业大学牧医工程学院
【基金项目】
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河南省科技攻关项目(0424050015).
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鸡传染性支气管炎病毒HN99株核蛋白(N)基因PCR产物经BamH Ⅰ、HindⅢ双酶切,克隆人大肠杆菌原核表达载体pMAL-p2X,构建重组表达质粒pMAL-p2X-N,转化大肠杆菌TB1并进行诱导表达.通过pMALTM融合蛋白纯化系统对表达产物进行非变性纯化,将纯化的N蛋白按常规方法免疫新西兰大白兔,制备兔抗鸡传染性支气管炎病毒N蛋白的多克隆抗体,并用ELISA法检测其生物活性.结果表明,表达的重组核蛋白纯化后出现2条带,相对分子质量分别约为92和82 ku,与Western blot出现的2条蛋白带
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