极耐热内切葡聚糖酶Cel12B的基因克隆、表达和酶学性质的研究

来源 :南京师大学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:eciling
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极耐热酶在工业生产中有可观的潜在用途,为此从极端嗜热厌氧细菌海柄热袍菌中通过PCR方法克隆出Cel12B基因,构建重组表达质粒pET-20b-Cel12B,转化至大肠杆菌JM109(DE3)诱导表达后,获得极耐热重组内切葡聚糖酶.经过热处理和组氨酸亲和层析柱纯化,获得电泳纯单一条带,酶学性质测定表明:最适作用pH为6.0,最适作用温度90℃,在pH5.3~6.5之间酶活力稳定,90℃半衰期70min。
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