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【目的】明确云南省德宏州、文山州和保山市油茶炭疽病菌的种类，筛选具有良好拮抗效果的生防菌。【方法】本研究于2019和2020年7—9月进行了病害调查，收集病叶标本，采用组织分离法分离病原菌，通过柯赫氏法则验证其致病性，联合形态学与多位点序列分析鉴定病原菌种类。同时从健康油茶叶片内分离筛选内生拮抗菌，并通过平板对峙法验证抑菌作用。【结果】云南省德宏州地区油茶炭疽病发生较严重，平均发病率为56.18%，病情指数为53.11，云南省油茶炭疽病菌种类主要有5种，分别是胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides、卡哈瓦炭疽菌C. kahawae、喀斯特炭疽菌C. karstii、松针刺盘孢C. fioriniae和暹罗刺盘孢C.siamense。其中，胶孢炭疽菌是优势病原菌，菌株CA17（暹罗刺盘孢）在活体油茶叶片上的致病性最强。平板对峙培养结果表明，采自德宏州健康油茶叶片的内生菌Streptomyces fulvissimus和Bacillus mojavensis对菌株CA17具有较好的拮抗作用，抑菌率分别达到37%和42%。【结论】本研究可为油茶炭疽病的诊断与绿色防控提供理论依据。