论文部分内容阅读
建立了枣（Ziziphus jujuba Mill．）cDNA-AFLP分析的优化体系和反应程序。提取获得的总RNA以人工合成的Oligo（dT）18为引物，利用鼠源反转录酶（M—MLVRT）合成cDNA第1链，合成双链cDNA后用限制性内切酶EcoRⅠ（识别6个碱基位点）与MseⅠ（识别4个碱基位点）酶切，酶切连接后，使用与接头序列互补的预扩引物对cDNA片段池进行PCR扩增，扩增后的cDNA池定量至1ng／μL，作为选择性扩增的模板，优化得到的选扩反应体系为：20μL的反应体系中含5μL模板，2μL1