【摘 要】
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以吉林农业大学经济动物疾病实验室分离并保存的鹿结核分枝杆菌流行株为模板,利用重叠延伸剪接技术(Splicing by overlap extension,SOE)设计引物,克隆Rv3874-Rv3875融合基因,
【机 构】
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吉林农业大学中药材学院,吉林农业大学动物科学技术学院,吉林市人民医院,教育部动物生产及产品质量安全重点实验室
【基金项目】
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国家科技支撑计划项目(2011BAI03B02-1), 国家自然科学基金项目(31372436), 吉林省科技厅科技支撑计划项目(20120225), 吉林省科技厅科技成果转化促进计划项目(20125067)
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以吉林农业大学经济动物疾病实验室分离并保存的鹿结核分枝杆菌流行株为模板,利用重叠延伸剪接技术(Splicing by overlap extension,SOE)设计引物,克隆Rv3874-Rv3875融合基因,构建重组表达质粒p GEX-4T-1-Rv3874-75,在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,并对目的蛋白进行纯化,表达产物通过SDS-PAGE和Western blot进行分析。结果表明:测序后融合基因Rv3874-Rv3875的序列与Gen Bank中序列的符合率为100%,重组
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