【摘 要】
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优化柚苷酶转化柚皮苷生成普鲁宁的工艺,在此基础上分离纯化得到浓度较高的普鲁宁。利用碱性缓冲液处理柚苷酶,使其β-葡萄糖苷酶的活力大部分丧失,而保留α-鼠李糖苷酶的活
【机 构】
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集美大学食品与生物工程学院,福建省食品微生物与酶工程重点实验室,福建省海洋功能食品工程技术研究中心,厦门市食品与生物工程技术研究中心,
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优化柚苷酶转化柚皮苷生成普鲁宁的工艺,在此基础上分离纯化得到浓度较高的普鲁宁。利用碱性缓冲液处理柚苷酶,使其β-葡萄糖苷酶的活力大部分丧失,而保留α-鼠李糖苷酶的活性,从而使酶水解柚皮苷的产物——普鲁宁得到积累。利用水解过程中还原糖生成量与普鲁宁生成量成正比的关系,用DNS法检测柚皮苷水解过程中还原糖的含量,分析不同工艺参数中普鲁宁的含量。通过对柚皮苷水解过程的动态分析,得到柚苷酶转化柚皮苷的最适条件:温度50℃,p H 4.0,酶用量10 U/m L,底物含量0.16%。在此条件下酶解90 min,普鲁宁还保持较高的浓度而柚皮苷基本转化完全。酶解液经化学萃取和硅胶柱层析,得到纯化的普鲁宁,用高效液相色谱检测,其纯度达到99%。
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