【摘 要】
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节杆菌BT801的乙内酰脲酶系能够水解5-苄基乙内酰脲生成L-苯丙氨酸,其中乙内酰脲水解酶负责乙内酰脲的水解开环.乙内酰脲水解酶的表达对于乙内酰脲酶的催化机制研究及氨基酸
【机 构】
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军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所
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节杆菌BT801的乙内酰脲酶系能够水解5-苄基乙内酰脲生成L-苯丙氨酸,其中乙内酰脲水解酶负责乙内酰脲的水解开环.乙内酰脲水解酶的表达对于乙内酰脲酶的催化机制研究及氨基酸的生物不对称合成都具有重要意义.通过PCR技术扩增得到乙内酰脲水解酶基因(hyuH),置于表达载体pT221的T7启动子下游,将构建的重组质粒引入大肠杆菌BL21(DE3).SDS-PAGE分析在相对分子量50kD处有一较强的表达带,经薄层扫描分析目的蛋白占全菌蛋白的40%,主要以可溶性形式存在,活性分析表明表达产物具有天然的酶活性.
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