【摘 要】
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目的:观察左归丸及其拆方对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经样细胞分化的影响。方法:采用全骨髓贴壁培养法培养、扩增BMSCs;观察细胞形态,采用流式细胞术检测细胞表面CD90
【机 构】
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上海中医药大学基础医学院实验中医学教研室; 上海中医药大学基础医学院生化教研室; 上海中医药大学教学实验中心;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No.81473583,No.81473572);上海市自然科学基金项目(No.15ZR1441400,No.16ZR1437400);上海中医药大学基础医学院第二批学术人才跋涉计划(2016年)~~
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目的:观察左归丸及其拆方对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经样细胞分化的影响。方法:采用全骨髓贴壁培养法培养、扩增BMSCs;观察细胞形态,采用流式细胞术检测细胞表面CD90、CD29、CD34和CD45表达以鉴定BMSCs;分别使用β-巯基乙醇、左归丸、左归丸8个拆方药物血清分别诱导BMSCs分化,采用免疫细胞化学法观察诱导后细胞表面神经标志蛋白Nestin、NSE和GFAP表达;Real-time PCR法检测诱导后干细胞因子(SCF)mRNA表达。结果:培养至第3代的BMSCs表面CD90和CD29表达呈阳性,CD34和CD45表达呈阴性;经β-巯基乙醇、左归丸及其拆方药物血清分别诱导后,BMSCs可见典型的神经元样改变,与空白对照组比较,各诱导组神经标志蛋白Nestin、NSE和GFAP表达均显著增高(P<0.05),SCF mRNA表达有升高的趋势。结论:左归丸及其拆方可诱导大鼠BMSCs分化,分化细胞具备神经细胞的形态及特征,且诱导后部分干细胞因子表达明显升高。
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