猪瘟病毒中国标准强毒株——F114株全长cDNA的构建

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应用RT-PCR技术,分段克隆了猪瘟病毒中国标准强毒株F1114株的全基因组,经测序验证,用DNAman软件比较分析与其它几个代表毒株的同源性,发现与Brescia、Alfort及C株核苷酸序列同源性分别为96.80%,86.03%和95.70%,氨基酸序列同源性分别为98.54%,93.33%和97.41%.将各段cDNA连接到pGEM-T和pB1uescriptⅡsk+质粒,得到两个亚克隆sk-0164(即sk+质粒中插入片断为1~6441nts,依次类推)和sk-64122,再将两个亚克隆连接成sk-12297,即CSFV全长cDNA克隆.
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