小胶质细胞激活研究中免疫组化和荧光技术的应用

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目的在体内和体外实验中应用免疫组化(immunohistochemistry, IHC)和免疫荧光(immunofluorescence, IF)技术检测神经炎症过程中小胶质细胞激活及炎症分子表达改变。方法应用IHC方法观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导SD大鼠脑内小胶质细胞离子钙接头蛋白分子1(ionized calciumbinding adaptor molecule 1, Iba-1)免疫标记的小胶质细胞改变;应用IF方法检测LPS诱导体外培养的小鼠小胶质细胞系BV2细胞吞噬异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)标记的荧光微球活性以及炎症细胞因子白细胞介素1 beta(interleukin 1beta, IL1beta)的表达变化。结果 IHC结果显示,2.5 mg/kg LPS可诱导大鼠皮层Iba-1阳性小胶质细胞形态改变;IF结果显示,10 ng/mL LPS组和100 ng/mL LPS组BV2细胞荧光微球吞噬率与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);100 ng/mL LPS处理后,BV2细胞的炎症细胞因子IL1beta表达上调。结论应用IHC和IF技术可证实LPS模型中小胶质细胞激活及炎症细胞分子表达改变。
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