【摘 要】
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目的 研究过表达巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对子宫颈癌SiHa细胞中白细胞介素8(IL-8)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达及细胞侵袭迁移能力的影响.方法 化学合成MIF cDNA,设计含Xhol和BamHI酶切位点的引物序列,利用聚合酶链反应(PCR)方法 扩增MIF基因片段,构建人pEGFP-N1/MIF真核表达载体,采用脂质体转染法将载体转染到SiHa细胞中;酶联免疫吸附法(ELISA
【机 构】
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030001太原,山西医科大学研究生学院,山西医学科学院山西大医院妇产科,030001太原,山西医科大学研究生学院,山西医学科学院山西大医院妇产科
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目的 研究过表达巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对子宫颈癌SiHa细胞中白细胞介素8(IL-8)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达及细胞侵袭迁移能力的影响.方法 化学合成MIF cDNA,设计含Xhol和BamHI酶切位点的引物序列,利用聚合酶链反应(PCR)方法 扩增MIF基因片段,构建人pEGFP-N1/MIF真核表达载体,采用脂质体转染法将载体转染到SiHa细胞中;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组上清液中MIF的表达,采用实时荧光定量PCR、免疫细胞化学法分别检测各组细胞中MIF、IL-8、MMP-9 mRNA和蛋白的表达,Boyden小室穿膜迁移实验检测过表达MIF对细胞迁移能力的影响.结果 转染pEGFP-N1/MIF组细胞上清液中MIF蛋白表达明显升高(F组别=8267.564,P< 0.01);转染pEGFP-N1/MIF组细胞中MIF、IL-8、MMP-9 mRNA及蛋白也均过表达(F值分别为7019.619、2148.094、3303.540、1565.114、2807.300、523.466,均P<0.01);Pearson相关分析表明,MIF与IL-8、MMP-9之间mRNA和蛋白的表达均存在正相关(r值分别为0.865、0.895、0.934、0.908,均P<0.01),转染pEGFP-Nl/MIF组细胞的迁移能力明显增强(F=3430.898,P< 0.01).结论 子宫颈癌SiHa细胞中过表达MIF能提高子宫颈癌细胞的侵袭、转移能力,其机制可能与IL-8、MMP-9表达上调相关。
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