【摘 要】
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采用紫外-可见吸收、荧光及圆二色(CD)等光谱法为主要分析手段,对光诱导高铁肌红蛋白(metmyoglobin,metMb)还原及其引起的蛋白结构变化进行了研究.采用氙灯430 nm的单色光和
【机 构】
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大连大学生物工程学院 大连116622;辽宁省生物有机化学重点实验室大连大学 大连116622
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采用紫外-可见吸收、荧光及圆二色(CD)等光谱法为主要分析手段,对光诱导高铁肌红蛋白(metmyoglobin,metMb)还原及其引起的蛋白结构变化进行了研究.采用氙灯430 nm的单色光和紫外灯对高铁肌红蛋白溶液进行光照实验,实验结果显示,在metMb的Q吸收带545 nm和580 nm附近吸收峰强度显著增强.通过验证性实验,证明光照后metMb发生了还原反应.验证性实验包括:metMb中加入还原剂连二亚硫酸钠实验；光照后样品加入氧化剂铁氰化钾的可逆性实验；光照的同时通入CO实验.进一步讨论表明,采用氙灯430 nm的单色光诱导metMb还原的机理为光诱导的分子内电子转移.此外,对光还原反应后的样品进行同步荧光和CD光谱分析,发现蛋白质色氨酸残基微环境极性增加,α-螺旋的含量由63％下降到57％,而β-折叠的含量增加了7％.
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