6-羟多巴胺去除股动脉交感神经的动物模型建立及相关研究

来源 :中华创伤骨科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong551
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目的 探讨6-羟多巴胺(6-OHDA)在体内去除兔股动脉交感神经的可行性,以期为研究单纯血管本身在组织工程骨中有无神经化作用提供理想的动物实验模型. 方法 分离16只新西兰兔右侧股动脉,采用不同药物处理:实验组采用含0.1 mg/mL 6-OHDA和质量百分比为0.1%抗坏血酸Krebs缓冲液处理,为确定药物干预后交感神经的恢复时间,将实验组再分为7d、14d和28 d取材组(n=4);对照组(n=4)采用仅含0.1%抗坏血酸Krebs缓冲液处理.分别用苏木精-伊红(HE)染色、乙醛酸激发单胺荧光染色检测股动脉组织变化、交感神经分布情况,并通过Western blot检测酪酸羟化酶(TH)和神经肽Y(NPY)蛋白表达水平的差异. 结果 HE染色结果显示:与对照组相比,3个取材组股动脉组织血管壁结构完整,无明显形态学改变.乙醛酸激发单胺荧光染色结果显示:对照组股动脉可见大量交感神经呈网状和放射状分布;7d和14 d取材组几乎不可见交感神经,28 d取材组有少量交感神经.Western blot检测结果表明:对照组、7d取材组、14d取材组及28 d取材组TH/β-actin比值平均分别为0.70±0.08、0.19±0.08、0.20±0.06、0.33 ±0.06; NPY/β-actin比值平均分别为0.68±0.14、0.14±0.02、0.17±0.02、0.53±0.10,各取材组的TH和NPY蛋白表达量较对照组均显著减少,而28 d取材组的TH和NPY蛋白表达量较7d、14d取材组明显增多,差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 体内局部应用6-OHDA可有效去除股动脉交感神经纤维,是一种可行的血管壁去交感神经方法.本研究建立了一种理想的化学去股动脉交感神经的动物模型。

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