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以大豆基因组DNA为模板，利用聚合酶链式反应（PCR）技术克隆了大豆胰蛋白酶抑制剂基因KSTI3的全长DNA片段，并将其构建到pMD18-T vector上。核苷酸序列测定结果表明：该基因片段全长654bp，与已发表的KSTI3基因序列同源性达99％。将反义＋正义基因片段插入到pBI121 35S启动子下，构建重组质粒pBIKSTI3。通过冻融法将该重组质粒转入根癌农杆菌EHA105中，获得了植物表达载体。