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目的
了解北京地区急性呼吸道感染患儿中人副流感病毒(HPIV)的感染状况。
方法(1)根据HPIV血凝素蛋白(HA)的基因保守区序列，合成能够区分HPIV 1~4型的多重巢式PCR引物，并用多种呼吸道病毒的标准毒株确定多重PCR方法的特异性；(2)收集2003年8月-2006年4月急性呼吸道感染患儿的临床标本3519例，应用逆转录多重PCR方法，对标本同时进行HPIV 1~4的检测。(3)随机选取不同型别的HPIV基因检测阳性标本共10例，对其PCR扩增产物直接进行核苷酸序列测定，并将所测到的序列与GenBank中的基因序列进行比较。
结果(1)多重PCR方法的特异性检测显示， HPIV的分离株cDNA有预期大小的扩增片段，与其他常见呼吸道病毒无交叉反应性。(2)3519例标本中多重PCR检测阳性的为349例，占本组检测标本的9.9%(349/3519)，明显高于间接免疫荧光方法和(或)病毒分离4.8%的阳性率(170/3519)；应用多重PCR方法还检测到HPIV1与HPIV3以及HPIV3与HPIV4的混合感染；在上呼吸道及下呼吸道感染的患儿中均有较高的HPIV阳性检出率；季节性分布分析显示，HPIV感染无明显的规律性，以HPIV1、3为主，HPIV2、4仅散发存在。(3)序列分析结果提示，所选取的多重PCR方法检测阳性的10例标本确实是HPIV阳性，其中有两份分别属于HPIV 4A、4B亚型。
结论HPIV在儿童感染中除了单-亚型感染外还可存在混合型感染。未发现其感染的季节性特点。所应用的逆转录多重RT-PCR方法不仅检出率高于常用的方法(间接免疫荧光方法和病毒分离)，而且能够直接进行亚型分析。除了检出常见的1、2、3型外，还检出了较少见的4型，属国内首次报道。