【摘 要】
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目的 探讨环磷酰胺( cyclophosphamide,CP)对术成熟睾丸血睾屏障紧密连接的损伤及其机制.方法 建立未成熟SD大鼠CP化疗损伤模型,电镜技术观察睾丸支持细胞间紧密连接的改变,S-P免疫组化法及免疫印迹法检测细胞间紧密连接蛋白 Occludin及ZO-1的表达、免疫荧光检测细胞骨架F-actin的表达情况,初步探讨体内CP损伤血睾屏障的机制.结果 ①电镜检测:对照组可见支持细胞连接处
【机 构】
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400014重庆重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科,400014重庆重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科,400014重庆重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科,400014重庆重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科,
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目的 探讨环磷酰胺( cyclophosphamide,CP)对术成熟睾丸血睾屏障紧密连接的损伤及其机制.方法 建立未成熟SD大鼠CP化疗损伤模型,电镜技术观察睾丸支持细胞间紧密连接的改变,S-P免疫组化法及免疫印迹法检测细胞间紧密连接蛋白 Occludin及ZO-1的表达、免疫荧光检测细胞骨架F-actin的表达情况,初步探讨体内CP损伤血睾屏障的机制.结果 ①电镜检测:对照组可见支持细胞连接处光滑清楚,走行自然；而处理组连接处细胞膜分离,其间出现较大间隙,连接旁内质网也出现程度不等的扩张；②SP免疫组化检测:Occludin及ZO-1的表达与对照组比较未见明显异常(P＞0.05):③免疫荧光检测:在对照组中可见F-actin在生精上皮及支持细胞中呈强荧光表达,而环磷酰胺处理后F-actin的荧光染色明显减少；④免疫印迹检测:结果发现F-actin的表达较对照组明显下降(P＜0.05),而紧密连接蛋白Occludin及ZO-1的表达与对照组比较差异未见明显异常(P＞0.05).结论 环磷酰胺可能通过下调F-actin的表达,干扰细胞紧密连接蛋白的功能,使血睾屏障紧密连接受到损伤。
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