人粒细胞集落刺激因子在家蚕细胞及幼虫中的高效表达

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:VIPYJS
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含信号肽序列的hG-CSF cDNA基因克隆于M13mp18中,测序表明其基因序列与高活性hG-CSF cDNA一致。将hG-CSF基因插入家蚕核型多角体病毒(BmNPV)转移载体pBE284,经与野生型病毒DNA共转染家蚕细胞后,通过体内同源重组的方式构建了重组病毒BmNPV-G-CSF,Southern印迹杂交表明重组病毒DNA中含G-CSF基因片段。重组病毒感染单层BmN细胞后第四天表达量达1.2×106CFU/ml培养液,Western-blot分析可见分子量为19×103左右一条带。家蚕幼虫感染重组病毒后第四天表达量达1.4×107CFU/ml血淋巴(hemolymph)。

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