探讨灭活双歧杆菌或双歧杆菌培养上清对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肠上皮细胞株(IEC-6)肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)和miRNA-146a mRNA表达的影响。
方法取对数生长期的IEC-6采用随机数字表法分为LPS组、培养上清组和灭活菌组。3组细胞均用5 mg/L的LPS刺激细胞5 h后，分别做下列处理：LPS组培养液中加入1 mL无菌9 g/L盐水继续培养24 h；培养上清组培养液中加入婴儿双歧杆菌培养上清1 mL继续培养24 h；灭活菌组培养液中加入1 mL 1×1010 CFU/L灭活婴儿双歧杆菌继续培养24 h。反转录(RT)-PCR法检测各组细胞中TRAF6、GSK-3β及miRNA-146a mRNA的表达。
结果培养上清组细胞TRAF-6(0.72±0.05)、GSK-3β(0.46±0.14)的mRNA相对表达量均低于LPS组(1.01±0.14，1.02±0.25)，miRNA-146a的mRNA相对表达量(3.05±0.40)高于LPS组(1.01±0.12)，差异均有统计学意义(t＝5.278、6.316、13.218，P＝0.000)；灭活菌组细胞GSK-3β的mRNA相对表达量(0.59±0.13)低于LPS组，差异有统计学意义(t＝4.837，P＝0.000)，而TRAF-6、miRNA-146a的mRNA相对表达量(1.05±0.11，0.78±0.22)与LPS组比较，差异均无统计学意义(t＝0.732、1.463，P>0.05)。培养上清组细胞TRAF6的mRNA相对表达量低于灭活菌组，miRNA-146a的mRNA相表达量高于灭活菌组，差异均有统计学意义(t＝6.009、14.687，P＝0.000)。
结论双歧杆菌培养上清和灭活菌对LPS刺激的IEC-6均有一定的保护作用；双歧杆菌培养上清的保护作用机制之一可能是通过升高miRNA-146a，降低炎症相关因子TRAF6和损伤因子GSK-3β水平实现的；灭活双歧杆菌的保护作用可能是通过降低损伤因子GSK-3β水平实现的。