【摘 要】
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目的 探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白-12(NLRP12)在铜绿假单胞菌角膜炎中的作用及其机制.方法 以同周龄的雄性Balb/C小鼠30只,铜绿假单胞菌感染建立小鼠铜绿假单胞菌
【机 构】
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深圳市宝安区松岗人民医院检验科,广东深圳,518105;深圳市龙华区中心医院检验科,广东深圳,518110
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目的 探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白-12(NLRP12)在铜绿假单胞菌角膜炎中的作用及其机制.方法 以同周龄的雄性Balb/C小鼠30只,铜绿假单胞菌感染建立小鼠铜绿假单胞菌角膜炎模型作为对照组,另取30只雄性Balb/C小鼠结膜下注射NLRP12-lentivirus 24 h后,将铜绿假单胞菌接种于其角膜,建立体内NLRP12的小鼠模型作为实验组.采用免疫荧光和Western-blot方法检测小鼠NLRP12蛋白在角膜细胞中的分布情况及炎症因子的水平,采用平板计数法进行细菌培养,分别在0、1和7d进行比较分析.结果 在1、7天实验组的角膜溃烂评分要显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),且两组小鼠的角膜细胞中均存在NLRP12活化的表现,实验组明显多于对照组,并且在实验组中可以发现NLRP12蛋白出现了明显的重新转移定位.实验组在第7天单位视野的细菌数量要显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);实验组在感染第7天,NLRP12蛋白不但在细胞核区具有较强的表达,而且细胞质到细胞核的转移较明显;在经过铜绿假单孢菌建模7 d后的角膜炎中NLRP12蛋白、Caspase-1、白介素-1β(IL-1β)均增高,且实验组增加幅度更大.结论 铜绿假单孢菌感染能促进上皮细胞NLRP12炎症小体的活化,在铜绿假单胞菌角膜炎中NLRP12具有抑制炎症反应和促进细菌清除的作用,可以作为角膜炎治疗的新靶点.
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