【摘 要】
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目的 评价甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测粪便ppENK基因高甲基化用于诊断胰腺癌的可行性.方法 收集胰腺癌患者24例和对照6例的新鲜粪便标本.采用MSP检测全部粪便标本中ppENK的甲基化状态；采用PCR检测全部粪便标本中野生型ppENK的阳性率.采用PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)检测粪便K-ras的突变情况.将胰腺癌细胞PC3单细胞悬液加入同一健康者粪便标本,MSP法检测ppE
【机 构】
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复旦大学附属金山医院消化科,200540,100730北京协和医院消化科,100730北京协和医院消化科
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目的 评价甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测粪便ppENK基因高甲基化用于诊断胰腺癌的可行性.方法 收集胰腺癌患者24例和对照6例的新鲜粪便标本.采用MSP检测全部粪便标本中ppENK的甲基化状态；采用PCR检测全部粪便标本中野生型ppENK的阳性率.采用PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)检测粪便K-ras的突变情况.将胰腺癌细胞PC3单细胞悬液加入同一健康者粪便标本,MSP法检测ppENK甲基化阳性,计算甲基化阳性时需掺入的胰腺癌细胞的最少数量.结果 30份粪便标本的甲基化检出率为0(0/30),非甲基化检出率为10％(3/30),野生型ppENK检出率为6.7％ (2/30)；PCR-RFLP可检测出所选10份野生型ppENK阴性的胰腺癌标本中的8份,其中7份有K- ras第12位密码子突变.MSP方法能够检测到粪便中ppENK甲基化条带所需胰腺癌细胞的数量至少为50个/ml.结论 采用MSP方法检测胰腺癌患者粪便标本的ppENK基因甲基化状态,尚不能成为筛查和诊断胰腺癌的方法。
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