【摘 要】
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为构建一个针对TCF25（transcription factor 25）基因的慢病毒干扰载体,设计并合成3组针对TCF25的短发夹RNA序列（shRNA）,通过基因重组技术连入p LL3.7载体,酶切鉴定及DNA测序后,重
【机 构】
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湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（81270156,81470377）, 湖南省社会发展支撑计划资助项目（2014SK3009）, 湖南省生物发育工程及新产品研发协同创新中心资助项目（2013-448-6）
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为构建一个针对TCF25（transcription factor 25）基因的慢病毒干扰载体,设计并合成3组针对TCF25的短发夹RNA序列（shRNA）,通过基因重组技术连入p LL3.7载体,酶切鉴定及DNA测序后,重组正确的p LL3.7质粒与病毒包装质粒共转染293FT细胞,培养48 h后,分别收集细胞培养上清液,感染H9C2细胞,Western-blot检测TCF25在H9C2细胞中的表达.结果显示TCF25蛋白在H9C2细胞中的表达被抑制.这说明TCF25的慢病毒干扰载体构建成功.
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