目的:建立LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)的浓度。方法:采用RRHD Eclipse Plus C18色谱柱(3.0 mm×100 mm,1.8μm),柱温为25℃,以水(含0.1%甲酸)-乙腈(90∶10)为流动相,流速为0.3m L·min-1。2种被测成分的监测反应质荷比分别为330.10→136.00(cAMP)、346.05→152.00(cGMP),内标化合物的监测反应质荷比为277.28→152.00(恩替卡韦)。结果:cAMP、cGMP的线性范围分别为0.010 1~1 010.00 ng·m L-1、0.010 0~1 000.00 ng·m L-1(r≥0.999 0),最低检测浓度分别为0.010 1、0.010 0 ng·m L-1。日内、日间RSD均小于15%,重复性好。采用LC-MS/MS方法测定大鼠血浆中cAMP、cGMP的浓度分别为(1.92±0.26)ng·m L-1和(3.61±0.40)ng·m L-1。结论:该方法灵敏、快捷、准确,专一性强,可用于药物代谢的分析研究及中医药作用机制研究。