目的:建立同时测定复方氯霉素滴眼液中氯霉素、醋酸泼尼松龙及其降解产物氯霉素二醇物含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Dionex Acclaim C₁₈,流动相为0.1%庚烷磺酸钠溶液-冰乙酸-乙腈-甲醇（60∶0.2∶30∶10,V/V/V/V）,流速为1.0 mL/min,检测波长为271 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果:氯霉素、醋酸泼尼松龙、氯霉素二醇物检测质量浓度线性范围分别为11.73⁷03.71μg/mL（r=0.999 8）、12.40⁷44.06μg/mL（r=0.999 8）、1.03⁶2.03μg/mL（r=0.999 8）;氯霉素二醇物的定量限为0.01μg/mL;精密度、稳定性试验的RSD<2.0%;氯霉素、醋酸泼尼松龙重复性试验的RSD<2.0%,氯霉素二醇物的RSD=4.5%;回收率分别为100.6%¹02.7%（RSD=0.60%,n=9）、97.5%¹00.3%（RSD=0.80%,n=9）、100.0%¹03.2%（RSD=1.10%,n=9）。结论:该方法结果准确、操作简便,可用于复方氯霉素滴眼液中氯霉素、醋酸泼尼松龙及其降解产物氯霉素二醇物含量的同时测定。