超声微泡对骨髓间充质干细胞CXC类趋化因子受体4表达的影响

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目的

探讨超声微泡(UM)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)CXC类趋化因子受体4(CXCR4)表达的影响及可能机制。

方法

取雄性SD大鼠骨髓,将培养至第3代生长良好的BMSCs分为对照组、超声(US)组、UM组、UM+过氧化氢酶组(UMC组)、UM+AMD3100组(UMA组)、UM+抗CXCR4抗体组(UMCX组)。对照组不予特殊处理,US组采用频率为1 MHz、强度为1 W/cm2的US辐照30 s,UM组在US组基础上加入微泡,UMC组在UM组基础上加入过氧化氢酶,UMA组在UM组基础上加入AMD3100,UMCX组在UM组基础上加入CXCR4抗体。采用qPCR和Western blotting技术测定对照组、US组、UM组及UMC组CXCR4 mRNA的转录和蛋白表达水平;干预后即刻、5 min、15 min,在显微镜下观察经Fluo-4/AM标记的对照组、US组、UM组BMSCs胞内荧光强度;采用迁移实验观察6组BMSCs向基质衍生因子-1α(SDF-1α)的趋化能力。

结果

US组BMSCs CXCR4 mRNA转录和蛋白表达水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),但均低于UM组(P<0.05);UMC组BMSCs CXCR4 mRNA转录和蛋白表达水平均较UM组低(P<0.05)。US组细胞内的荧光强度与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),但均低于UM组(P<0.05)。US组向SDF-1α的移行细胞数(22.4±2.2)与对照组(20.5±2.3)比较,差异无统计学意义(P>0.05),但均少于UM组(53.1±3.8)(P<0.05);UMC组(35.2±3.1)、UMA组(32.5±2.8)和UMCX组(30.7±2.9)向SDF-1α的移行细胞数均较UM组减少(P<0.05)。

结论

UM可以促进BMSCs CXCR4的转录和表达,增加BMSCs向SDF-1α的移行数,该效应可能与钙离子的内流增加有关。

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