【摘 要】
：
目的:分离兔髓核脊索细胞(notochordal cells,NC)及骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC),通过非接触共培养探讨NC对MSC细胞表型的影响.方法:4～6周龄新西兰兔8只,取胸
【机 构】
：
山西大医院,华中科技大学附属协和医院骨科
论文部分内容阅读
目的:分离兔髓核脊索细胞(notochordal cells,NC)及骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC),通过非接触共培养探讨NC对MSC细胞表型的影响.方法:4～6周龄新西兰兔8只,取胸腰段脊柱的髓核,用密度梯度离心提取NC,同时取其股骨骨髓用FICOLL液分离MSC,将NC和MSC等比例(1:1)通过transwell培养板进行非接触共培养作为实验组,单纯MSC细胞培养作为对照组,光镜下观察细胞的生长情况.对两组的MSC行免疫组化及RT-PCR、Western-blot检测MSC细胞表型的改变情况.结果:原代NC呈圆形或椭圆形,细胞体积大,细胞增殖不明显;MSC贴壁生长,呈三角形或梭形,漩涡状排列.甲苯胺蓝染色:对照组MSC细胞核淡染,胞体染色不明显,染色阴性;实验组MSC可见从第3天开始胞体及胞外基质出现紫红色,第5天染色更加明显.Ⅱ型胶原免疫组化对照组MSC淡染,细胞形态不清楚;实验组第3天出现MSC内出现棕黄色深染,随着时间推移细胞染色加深呈阳性表现.RT-PCR检测,经过5d非接触共培养后实验组蛋白聚糖的基因表达为对照组的2.35倍(P＜0.05),Ⅱ型胶原的基因表达为对照组的1.61倍(P＜0.05),对照组Ⅰ型胶原的基因表达为实验组的2.56倍(P＜0.05).Western-blot检测后发现:经过5d非接触共培养,实验组蛋白聚糖的含量为对照组的1.61倍(P＜0.05),Ⅱ型胶原的表达为对照组的10.04倍(P＜0.05)(P＜0.05).结论:在非接触共培养条件下脊索细胞可以诱导骨髓间充质干细胞表型发生变化,向类软骨细胞方向分化,这将为组织工程化髓核的种子细胞筛选提供新选择.
其他文献
目的：分析本院心脏瓣膜置换的启动和开展过程，为基层医院开展此类工作提供借鉴。方法2011年2月至2013年11月行心脏瓣膜置换术45例（观察组），选取同期在第三军医大学大坪医院行二尖
目的：观察改良的Brostr?m法联合踝关节镜治疗训练伤所致慢性踝关节不稳的临床疗效。方法选择20例保守治疗无效的踝关节慢性不稳的患者，采用改良的Brostr?m法进行距腓前韧带和跟
基于对粤东五华河干流和支流水体的物理、化学组成测试数据,应用质量平衡法和相关分析法探讨湿热山地丘陵地区岩石化学风化过程对大气CO2的吸收.结果表明:五华河水体的总溶解
利用硅烷偶联剂对纳米结晶纤维素(NCC)进行表面改性以提高其对水性聚氨酯的浸润性,并以改性NCC关于水性聚氨酯的接触角为主要依据,研究了NCC表面改性对浸润性影响规律.实验以
早泄（premature ejaculation ，PE）是一种常见的射精功能障碍，它不仅受躯体因素的影响，也受心理和神经因素的影响。目前，人们对PE的确切定义仍然存在争议。综合美国精神病学诊断统计
慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary dis-ease ，COPD）是一种具有气流受限特征的可以预防和治疗的疾病，气流受限不完全可逆、呈进行性发展［1］，与患者气道对香烟烟雾等有
胶质瘤是发生于神经外胚层的肿瘤。神经胶质瘤占原发性中枢神经系统肿瘤约40％左右，是恶性肿瘤呈浸润性生长。目前，国内外学者一致认为神经胶质细胞的发生、发展受多基因的调控，是
结肠癌作为最常见的恶性肿瘤之一，在全世界男性的发病率排名第3位，病死率第4位，女性的发病率排名第2位，病死率第3位［1］。在过去的30多年里，包括中国在内的许多国家或地区结肠癌发病
提出了一种能够同时检测具有紫外吸收(UV)的有机物和无紫外吸收的无机物含量的强阴离子交换色谱法(IEC).以检测己内酰胺副产物中的1-磺酸基环己烷羧酸(SCCA)粗盐为具体实例开
试验利用响应面法对地衣芽孢杆菌S6产角蛋白酶的培养基进行优化.单因素试验表明:(K2HPO4/KH2PO4)、NaCl和MgSO4最佳水平分别为1.4/0.7、0 3和0.1 g/L,响应面优化地表芽孢杆菌