【摘 要】
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从土壤样品中通过筛菌过程获得一株产脂肪酶的菌株,经16S rRNA鉴定属于短小芽孢杆菌,根据已报道的来源于芽孢杆菌的脂肪酶基因设计引物,克隆获得其全长基因,命名为lipS6,大小
【机 构】
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南京林业大学轻工科学与工程学院酶与发酵工程实验室,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室鲁华生物技术研究所
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(“863”计划)(2012AA020403);国家自然科学基金项目(31201296/C200101);生物反应器工程国家重点实验室开放课题;南京林业大学引进高层次人才科研基金项目;江苏高校优势学科建设工程资助项目
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从土壤样品中通过筛菌过程获得一株产脂肪酶的菌株,经16S rRNA鉴定属于短小芽孢杆菌,根据已报道的来源于芽孢杆菌的脂肪酶基因设计引物,克隆获得其全长基因,命名为lipS6,大小为648 bp,编码215个氨基酸,经比对其与已报道的脂肪酶基因B26有96%的同源性。构建重组表达质粒pET32a-lipS6,在大肠杆菌中实现了可溶表达,酶活达到2 000 U/mL。重组脂肪酶LipS6的最适温度为30℃,最适pH为9,低浓度的Ca2+与Mn2+对其有很明显的激活作用,疏水性有机溶剂对其毒害作用小,在正己烷体系中可以催化酯化反应,最适酯化底物酸为十四酸,底物醇为正丁醇。
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