【摘 要】
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目的 分析胃癌细胞释放外泌体在缺氧诱导胃癌进展中的作用和分子调控机制.方法 通过超速离心法提取胃癌细胞培养基中外泌体,利用电子显微镜、免疫印迹法对外泌体进行鉴定,RT-PCR分析外泌体、胃癌细胞中miR-143-5p水平.构建miR-143-5p antagomir/angomir分别抑制、增强胃癌细胞中miR-143-5p的表达.双萤光素酶报告基因验证miR-143-5p与下游SMDT1 mRNA的偶联.利用细胞划痕愈合实验分析胃癌细胞迁移、侵袭能力变化,细胞克隆形成实验分析胃癌细胞增殖能力变化.结果
【机 构】
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长江大学附属仙桃市第一人民医院胃肠外科,湖北 仙桃 433000;华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科;长江大学附属仙桃市第一人民医院内分泌科
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目的 分析胃癌细胞释放外泌体在缺氧诱导胃癌进展中的作用和分子调控机制.方法 通过超速离心法提取胃癌细胞培养基中外泌体,利用电子显微镜、免疫印迹法对外泌体进行鉴定,RT-PCR分析外泌体、胃癌细胞中miR-143-5p水平.构建miR-143-5p antagomir/angomir分别抑制、增强胃癌细胞中miR-143-5p的表达.双萤光素酶报告基因验证miR-143-5p与下游SMDT1 mRNA的偶联.利用细胞划痕愈合实验分析胃癌细胞迁移、侵袭能力变化,细胞克隆形成实验分析胃癌细胞增殖能力变化.结果 缺氧诱导胃癌细胞HGC、AGS高分泌外泌体促进了常氧胃癌细胞的增殖克隆、迁移和侵袭能力增加.缺氧诱导胃癌细胞及外泌体高表达miR-143-5p,并且通过外泌体转导并促使常氧胃癌细胞的miR-143-5p上调.在线数据库Starbase中胃癌组织miR-143-5p呈明显高表达趋势,而且与胃癌患者不良预后明显正相关.萤光素酶报告基因预测并证实了miR-143-5p与抑癌基因SMDT1 mRNA的偶联结合,并且竞争性抑制SMDT1 mRNA转录表达.富含miR-143-5p的缺氧缓解外泌体被常氧胃癌细胞内吞,并通过抑制SMDT1表达,可间接激活PI3K/Akt途径促进了这些常氧胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移.相反,通过转染miR-143-5p antagomir抑制miR-143-5p表达,或使用PI3K抑制剂LY294002阻断PI3K/Akt通路可有效抑制缺氧胃癌细胞衍生的外泌体介导的促癌作用.结论 胃癌中的缺氧微环境可能促进肿瘤细胞释放富含miR-143-5p的外泌体,进而被常氧胃癌细胞以内吞方式吸收并最终促进癌细胞的侵袭、克隆增殖.
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目的 比较利福昔明和诺氟沙星预防自发性细菌性腹膜炎(spontaneous bacterial peritonitis,SBP)的疗效.方法 检索PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science、Google学术、中国知网、维普中文科技期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库和万方科技期刊全文数据库,搜集利福昔明和诺氟沙星预防SBP疗效的随机对照研究,检索时间为建库以来至2020年6月.对符合纳入标准的文献进行资料提取,使用Cochrane偏倚风险评估工具评估文献的