【摘 要】
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目的 探究长链非编码RNA(LncRNA)的INK4基因座中反义非编码RNA(ANRIL)对肺腺癌细胞厄洛替尼抵抗(ER)的影响及相关机制.方法 将培养的人肺腺癌PC9细胞分为5组:对照组、厄洛替
【机 构】
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铜仁市人民医院肿瘤科,贵州铜仁 554309
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目的 探究长链非编码RNA(LncRNA)的INK4基因座中反义非编码RNA(ANRIL)对肺腺癌细胞厄洛替尼抵抗(ER)的影响及相关机制.方法 将培养的人肺腺癌PC9细胞分为5组:对照组、厄洛替尼处理(ET)组、ER组、转染1组和转染2组.对照组用二甲基亚砜同步处理后转染GV248对照载体;ET组用0.2μmol·L-1厄洛替尼处理24 h后转染GV248对照载体;ER组用梯度递增的厄洛替尼处理至6.4μmol·L-1,维持2周后转染GV248对照载体;转染1组用梯度递增的厄洛替尼处理至GV248对照载体维持2周后,转染siANRIL载体;转染2组用转染1组细胞进一步转染过表达SLUG载体.用实时定量聚合酶链反应法检测各细胞系中LncRNA ANRIL、转录因子SLUG基因的表达,蛋白质印迹法检测各细胞系中各蛋白表达,CCK-8实验检测各细胞系厄洛替尼半抑制浓度(IC50).结果 对照组、ET组、ER组、转染1组和转染2组细胞中ANRIL基因表达分别为1.00±0.10,0.63±0.05,3.25±0.59,0.43±0.06和0.45±0.05;这5组的SLUG基因表达分别为1.00±0.08,0.55±0.07,3.83±0.24,3.36±0.10和8.18±0.03;ER组、转染1组和转染2组与对照组和ET组比较,ANRIL、SLUG基因表达的差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).对照组、ER组、转染1组和转染2组的厄洛替尼IC50分别为(0.26±0.04),(5.75±0.79),(3.09±0.52)和(7.57±0.94)μmol·L-1;ER组、转染1组和转染2组与对照组相比,或转染1组与ER组比较,或转染2组与转染1组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).蛋白结果的趋势与基因一致.结论 肺腺癌ER与LncRNA ANRIL的重新表达密切相关,ANRIL可通过SLUG途径促进肺腺癌细胞上皮间充质转化(EMT)进程和ER.
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