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RNA干扰（RNAi）是由双链RNA（dsRNA）诱发的特异性沉默目的基因表达的过程,一种大规模制备双链RNA的方法可以便利RNAi技术的应用。以斑节对虾kazal型蛋白激酶抑制剂（KPI）基因为例,详细介绍了一种以体内载体表达大量制备dsRNA（〉300nt）的方法。使用商业载体pGEMT和pDRIVE,以2步克隆法构建含有发夹环（hairpin loop）dsRNA表达载体,转化RNA酶Ⅲ缺陷的大肠杆菌HT115（DE3）进行体内转录制备dsRNA。构建的发夹RNA表达载体含有494bp的正向靶序列和