反义bcl—2 mRNA对人神经母细胞瘤细胞SH—SY5Y生长和凋亡的作用

来源 :中国医学科学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jayexxfu1
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目的研究反义bcl-2 mRNA对人神经母细胞瘤(NB)细胞株SH-SY5Y的生长和凋亡的作用.方法采用定向克隆构建携带反义bcl-2 cDNA片段的逆转录病毒载体PBabe-puro/Asbcl-2;应用脂质体Lipofectamine转染SH-SY5Y,经嘌呤霉素筛选,应用RT-PCR证实外源性反义bcl-2 mRNA的表达,建立细胞株SH-SY5Y/Asbcl-2;应用免疫组化和Western印迹分析Bcl-2蛋白的表达变化;MTT法做细胞的生长曲线观察细胞的生长情况;通过提取基因组DNA检测顺式氯
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