【摘 要】
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目的探讨NADPH氧化酶在人真皮成纤维细胞氧化应激损伤中的作用。方法 H2O2构建氧化应激模型,将实验分为正常组、氧化损伤组和NADPH氧化酶抑制剂(DPI)组,MTT检测细胞活力,DCFH-D
【机 构】
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南方医科大学附属顺德第一人民医院皮肤科
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目的探讨NADPH氧化酶在人真皮成纤维细胞氧化应激损伤中的作用。方法 H2O2构建氧化应激模型,将实验分为正常组、氧化损伤组和NADPH氧化酶抑制剂(DPI)组,MTT检测细胞活力,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)改变,Western blot分析NADPH氧化酶胞膜亚基gp91phox表达变化。结果 H2O2对成纤维细胞的氧化损伤呈时间和浓度依赖,H2O2700μmol/L处理24 h后细胞活力下降约40%(P<0.05),ROS升高2倍(P<0.05)。而抑制剂组细胞活力较氧化损伤组增加20%(P<0.05),ROS下降至正常水平(P<0.05)。Western blotting结果显示氧化损伤组gp91phox表达随H2O2浓度逐渐升高,而抑制剂组表达接近正常水平。结论 H2O2可通过影响NADPH氧化酶特别是胞膜亚基gp91phox引发成纤维细胞氧化损伤。
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