目的建立反相高效液相色谱法测定大鼠血浆咪达唑仑的浓度,并研究咪达唑仑透皮贴剂在大鼠体内的药代动力学。方法采用经皮给药方式,在小鼠腹部给予咪达唑仑透皮贴剂后,于不同时间点取血,样品经处理后采用反相高效液相色谱法测定咪达唑仑的血药浓度,采用色谱柱为Hypersil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈—水(内含0.1%三乙胺)(52∶48,V/V),流速为1 mL·min-1,柱温为25℃,进样量为20μL。结果咪达唑仑检测的线性范围为0.10～10.0μg·mL-1,最低检测限是0.01μg·mL-1。日内、日间精确度,稳定性RSD均小于10%;方法回收率均大于80%,准确度RE均在-10%～20%之间。咪达唑仑贴剂在大鼠体内的主要药代学参数Cmax、Tmax、T1/2α、T1/2β、AUC和CL分别为(1.69±0.084)μg·mL-1、6 h、(2.39±0.042)h、(8.05±0.11)h、(17.69±0.34)μg.h.mL-1和(2.54±0.048)L.h-1。结论反相高效液相色谱法用于测定咪达唑仑浓度操作简单、测定结果可靠。所制咪达唑仑透皮贴剂有一定的控释作用。