【摘 要】
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目的构建结核分枝杆菌Ag85B/GST融合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌(E.coli)中诱导表达.方法以质粒pUC18/Ag85B为模板,用PCR法扩增结核杆菌Ag85B基因,扩增的Ag85B上游含有EcoR Ⅰ
【机 构】
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第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科
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目的构建结核分枝杆菌Ag85B/GST融合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌(E.coli)中诱导表达.方法以质粒pUC18/Ag85B为模板,用PCR法扩增结核杆菌Ag85B基因,扩增的Ag85B上游含有EcoR Ⅰ酶切位点,下游含有SaLⅠ酶切位点;将Ag85B基因定向插入质粒pGEX-4T-1中,构建原核表达质粒pGEX-Ag85B并转化E.coli BL21,筛选阳性重组子,限制性内切酶切鉴定和DNA序列测定,异丙基硫代半乳糖苷(IPG)诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定结果.结果成
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