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目的
建立稳定表达增强型GFP(EGFP)-LC3的AR42J细胞。
方法利用慢病毒过表达载体Lentiviral-EGFP-LC3包装成慢病毒，感染大鼠胰腺腺泡细胞AR42J。以Lentiviral-EGFP感染作为阴性对照。通过倒置荧光显微镜观察及流式细胞分析仪检测病毒感染效率，蛋白质印迹法检测稳定传代细胞株的LC3蛋白表达。用毒胡萝卜素处理细胞建立内质网应激模型，采用蛋白质印迹法检测应激的AR42J细胞的LC3、PERK蛋白表达。
结果AR42J细胞的Lentiviral-EGFP-LC3感染效率>85%，并能稳定传代。Lentiviral-EGFP-LC3感染的AR42J细胞的LC3 mRNA表达量为未感染细胞的(9.14±0.32)倍；LC3蛋白阳性表达并有EGFP-LC3融合蛋白的表达。Lentiviral-EGFP感染的AR42J细胞的LC3 mRNA表达量为未感染细胞的(1.08±0.07)倍，无LC3蛋白表达，仅有GFP表达。与未感染组比较，EGFP-LC3组的LC3 mRNA表达显著升高，差异有统计学意义(P<0.05)，而EGFP组的差异无统计学意义。
结论成功构建了稳定表达EGFP-LC3的大鼠胰腺外分泌细胞AR42J，为进一步研究急性胰腺炎与自噬的关系提供了新的细胞模型。