【摘 要】
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根据从西非植物Pentadiplandra brazzeanaBaillion果实中分离的甜蛋白Brazzein的成熟区氨基酸序列,按照大肠杆菌(Escherichia coli)的密码子偏好人工合成了4对末端具粘合位点
【机 构】
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浙江大学生物系统工程与食品科学学院,浙江大学生物系统工程与食品科学学院,亚盛博士后科研工作站北京分站
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根据从西非植物Pentadiplandra brazzeanaBaillion果实中分离的甜蛋白Brazzein的成熟区氨基酸序列,按照大肠杆菌(Escherichia coli)的密码子偏好人工合成了4对末端具粘合位点的寡聚核苷酸序列,经连接和PCR扩增后得到了179 bp的Brazzein类似物的编码序列,插入pET30a载体构建成重组表达载体pET-Bra.诱导表达后得到了与预计分子量相同的蛋白,约占细菌可溶性蛋白的12.8%,分离纯化的des-pGLU1-Brazzein甜度约是同等重量蔗糖的60
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