【摘 要】
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目的 研究生长抑制DNA损伤基因(grow th arrest and DNA dam age, gadd)对卵巢癌细胞生长抑制和凋亡的作用。 方法 RT-PCR鉴定卵巢癌SKOV3 和3AO细胞株gadd153 基因表达。通过目的基因的克隆、载体构建技术,将目的基因gadd153 重组于plXSN-neo 逆转
【机 构】
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目的 研究生长抑制DNA损伤基因(grow th arrest and DNA dam age, gadd)对卵巢癌细胞生长抑制和凋亡的作用。 方法 RT-PCR鉴定卵巢癌SKOV3 和3AO细胞株gadd153 基因表达。通过目的基因的克隆、载体构建技术,将目的基因gadd153 重组于plXSN-neo 逆转录病毒表达载体;构建的pLXSN-gadd153载体采用脂质体(lipofectin)(DOTAP)的方法,分别转染SKOV3 和3AO细胞株;经G418 抗性筛选;RT-PCR表达鉴定;足叶乙甙(VP16)诱导,采用流式细胞仪分析(FCM)的方法检测转染前后肿瘤细胞的生长抑制和凋亡。 结果 SKOV3-gadd153 细胞生长抑制在G1/G0 期,部分细胞进入凋亡的状态;3AO-gadd153 细胞生长抑制,未引起凋亡。 结论 转染gadd153 基因的肿瘤细胞系,诱导表达后可诱发肿瘤细胞生长抑制在G1/G0期,并有细胞进入凋亡状态。证实gadd153 基因参与了细胞生长抑制和凋亡过程。
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