壁虎多肽混合物对HepG2细胞增殖及内质网应激途径的影响

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目的研究壁虎多肽混合物(GPM)对人肝癌HepG2细胞增殖及内质网应激途径的影响。方法用不同浓度GPM(0,0.15,0.20,0.25,0.30,0.35,0.40,0.45 mg·mL-1)处理HepG2细胞24 h。以噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,根据MTT结果,将细胞分为空白组和低、中、高3个质量浓度(GPM:0.1,0.2,0.3 mg·mL-1)实验组,对照组(氟尿嘧啶10μg·mL-1)。以Western blot法检测内质网应激相关蛋白及凋亡相关蛋白的表达水平。结果 GPM可抑制HepG2细胞的增殖,并具有质量浓度依赖性,作用24,48,72h后,其IC50值分别为0.27,0.23,0.20 mg·mL-1。正常组、对照组和低、中、高3个质量浓度实验组的双链RNA依赖的蛋白激酶样ER激酶(PERK)与GAPDH灰度比值分别为(4.31±0.81)×10-2,(8.92±0.91)×10-2,(20.73±0.97)×10-2,(24.04±0.95)×10-2,(11.65±1.67)×10-2。这5组的GRP78与GAPDH灰度比值分别为(27.99±2.36)×10-2,(35.58±1.02)×10-2,(42.55±1.19)×10-2,(54.91±1.20)×10-2,(7.31±1.01)×10-2。这5组的ATF4与GAPDH灰度比值分别为(20.82±1.42)×10-2,(39.60±0.56)×10-2,(52.02±1.83)×10-2,(73.39±1.83)×10-2,(18.13±2.28)×10-2;这5组的CHOP与GAPDH灰度比值分别为(8.71±0.76)×10-2,(11.27±1.07)×10-2,(41.29±1.36)×10-2,(48.55±1.37)×10-2,(33.01±3.95)×10-2。这5组的多聚ADP-核糖聚合酶(PARP)与GAPDH灰度比值分别为(13.06±2.88)×10-2,(36.79±2.10)×10-2,(58.72±1.53)×10-2,(67.61±1.68)×10-2,(34.88±2.02)×10-2。这5组的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)与GAPDH灰度比值分别为(5.92±0.33)×10-2,(14.71±1.11)×10-2,(17.58±1.33)×10-2,(35.41±2.91)×10-2,(5.94±1.61)×10-2,与正常组相比,4个给药组的以上各项指标差异均有统计学意义(均P<0.05)。提示GPM可能通过诱导HepG2细胞内质网应激从而诱导细胞凋亡。结论 GPM可抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与诱导HepG2细胞内质网应激有关。
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