【摘 要】
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在两栖动物,尤其是蛙皮肤中已分离得到多种生物学活性物质.而构建皮肤c DNA文库,有助于筛选活性组分,并保存其功能基因.本试验以花狭口蛙皮肤组织为材料,根据Trizol法提取皮
【机 构】
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内蒙古民族大学动物科技学院,海南大学农学院,海南大学海洋学院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30700128)
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在两栖动物,尤其是蛙皮肤中已分离得到多种生物学活性物质.而构建皮肤c DNA文库,有助于筛选活性组分,并保存其功能基因.本试验以花狭口蛙皮肤组织为材料,根据Trizol法提取皮肤总RNA后,使用CreatorTMSMARTTMc DNA文库构建试剂盒,运用SMART技术构建文库,经反转录反应合成c DNA第一链,LD PCR法将第一链产物扩增再合成双链c DNA;经蛋白酶K和Sfi I消化后,用CHROMA APIN-400分离双链c DNA;将合适大小的ds c DNA通过T4DNA连接酶16℃过夜孵育
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