苦参素逆转人肝癌细胞株HepG2/ADM多药耐药的作用

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目的:探讨苦参素(oxymatrine,OM)体外逆转人肝癌耐药细胞株多药耐药的作用及其机制.方法:MTT法检测耐药细胞株HepG2/阿霉素(adriamycin,ADM)多药耐药性及苦参素干预前后耐药细胞药敏性的变化;流式细胞术检测苦参素对耐药细胞细胞凋亡及细胞膜表面P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达的影响;实时荧光定量PCR法检测苦参素作用前后耐药细胞内三磷酸腺苷结合运转蛋白B1(ATP-binding cassette,sub-family B member1,ABCB1)基因的表达的变化.结果:当苦参素浓度为0.5 mg/mL时对HepG2及HepG2/ADM 2种细胞株的生长抑制率均<10%,无明显毒性作用.HepG2/ADM细胞株对ADM、顺铂(cisplatin,CDDP)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)3种化疗药物表现出不同程度的耐药性,其耐药指数分别为27.52、5.50、4.39.无细胞毒性的0.5 mg/mL浓度的苦参素能够部分逆转HepG2/ADM对上述3种化疗药物的耐药性,其逆转倍数分别为3.68、2.82、2.03倍.苦参素作用HepG2/ADM细胞24、48、72 h后,各组细胞早期细胞凋亡率较各阴性对照组均有所提高且随OM作用时间的延长而逐渐增加(1.77%±0.25%vs 0.50%±0.10%,2.53%±0.15%vs 0.63%±0.06%,3.83%±0.42%vs 0.66%±0.06%,P<0.05).苦参素作用48 h后与阴性对照组比较HepG2/ADM耐药细胞株ABCB1基因表达下调,其比率为0.49倍;耐药细胞株细胞膜表面P-gp的表达下调(21.50%±1.08%vs 40.83%±0.35%,P<0.01).结论:苦参素能够在体外逆转人肝癌耐药细胞株HepG2/ADM的多药耐药性,其作用机制可能与其提高耐药细胞早期细胞凋亡率,下调耐药相关基因ABCB1及其蛋白表达产物P-gp的表达有关.
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