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目的建立同时测定复方两性霉素B眼用凝胶中两性霉素B和利福平含量的高效液相色谱法。方法采用Diamonsil C18柱（250mm×4．6mm，5μm），以0．005mol／L乙二胺四乙酸二钠-乙腈（65：35）为流动相，流速为1．0ml／min，检测波长为334nm，柱温为20℃。结果曲性霉素B的线性范围为4．816～48．16μg／ml，r=0．9999，平均回收率为99．3％，RSD=1．0％（n=9）；利福平的线性范围为1．739～17．39μg／ml，r=0．9999，平均回收率为99．