【摘 要】
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目的对P-糖蛋白胞外段基因进行表达研究.方法根据P-糖蛋白抗原性分布曲线及mdr1基因结构,设计了一对引物,PCR扩增产物插入到pGEM-T中,经测序正确后,再克隆入表达载体pGEX-2T,
【机 构】
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第三军医大学附属新桥医院泌尿外科,军事医学科学院基础医学研究所肿瘤分子生物室
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目的对P-糖蛋白胞外段基因进行表达研究.方法根据P-糖蛋白抗原性分布曲线及mdr1基因结构,设计了一对引物,PCR扩增产物插入到pGEM-T中,经测序正确后,再克隆入表达载体pGEX-2T, 构建高效表达载体pGEX-Pgp,转化大肠杆菌DH5α,进行表达、鉴定及纯化.结果经IPTG诱导4 h,蛋白表达即达高峰,SDS-PAGE分析,表达出约30 kD大小的蛋白.结论该基因片段的高效表达为进一步制备其抗体或筛选其特异性结合肽,进行靶向治疗等工作奠定了基础.
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