人HSC70基因真核表达载体的构建和表达

来源 :中国现代医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：blackhorse1983

【摘要】

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目的构建HSC70（HSC）真核表达质粒，并在HepG2细胞中表达。方法采用RT—RCR方法从正常人肝细胞系QZE中得到HSC70的cDNA序列，然后克隆入pcDNA^TM3．1／V5-His^A载体，构建重组质粒pcDNA-HS

【作者】

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苏海霞张景霞王安辉李端闫永平

【机构】

：

第四军医大学预防医学系流行病学教研室

【出处】

：

中国现代医学杂志

【发表日期】

：

2008年4期

【关键词】

：

HSC70 肝细胞克隆真核表达 heat shock cognate protein 70 hepatocyte cloning eukaryotic

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目的构建HSC70（HSC）真核表达质粒，并在HepG2细胞中表达。方法采用RT—RCR方法从正常人肝细胞系QZE中得到HSC70的cDNA序列，然后克隆入pcDNA^TM3．1／V5-His^A载体，构建重组质粒pcDNA-HSC70；经酶切和测序鉴定后，将pcDNA-HSC70体外转染HepG2细胞系，瞬时表达带有His标签的HSC70融合蛋白；并通过免疫细胞化学方法检测蛋白表达情况。结果RT—PCR扩增到1960bp的HSC70 cDNA片断，经测序分析与GenBank中已知序列一致；重组质粒pcD

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