【摘 要】
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目的探讨从恶性浆膜腔积液中体外诱导培养出成熟树突状细胞(DCs)的方法。方法采用密度梯度离心法分离恶性浆膜腔积液来源的单核细胞,待细胞贴壁后加入粒细胞巨噬细胞集落刺激
【机 构】
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南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤中心,
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目的探讨从恶性浆膜腔积液中体外诱导培养出成熟树突状细胞(DCs)的方法。方法采用密度梯度离心法分离恶性浆膜腔积液来源的单核细胞,待细胞贴壁后加入粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)100ng/ml和IL-4 100U/ml,分为多聚次黄嘌呤胞嘧啶核苷酸(PolyI:C)25μg/ml组(A组)和TNF-α20ng/ml组(B组)。显微镜下观察细胞形态,采用流式细胞术检测DCs表型,混合淋巴细胞反应检测DCs刺激T细胞的增殖活性。结果 A、B两组均获得成熟DCs,高表达CD83、CD80、CD86和CD40,且DCs均能明显刺激T细胞增殖。结论恶性浆膜腔积液来源的单核细胞经细胞因子序贯、联合诱导能够产生成熟DCs。
Objective To investigate the method of culturing mature dendritic cells (DCs) from malignant serous effusions in vitro. Methods Mononuclear cells derived from malignant serous effusion were isolated by density gradient centrifugation. When GM-CSF 100ng / ml and IL-4 100U / ml were adherent, Poly Polymerase (PolyI: C) 25μg / ml group (A group) and TNF-α20ng / ml group (B group). The morphology of DCs was observed under the microscope. The phenotypes of DCs were detected by flow cytometry. The proliferative activity of T cells stimulated by DCs was detected by mixed lymphocyte reaction. Results The mature DCs were obtained in both A and B groups, with high expression of CD83, CD80, CD86 and CD40, and DCs could obviously stimulate T cell proliferation. Conclusion Malignant serous effusion of mononuclear cells by cytokines sequential, combined induction can produce mature DCs.
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